1、外植体的获得从盆栽的生长旺盛、无病虫害的景天植株上切取带腋芽的幼嫩茎段,剪去多余叶片后,先在洗衣粉液中漂洗5分钟,再在自来水下冲洗30分钟。然后在超净工作台上用75%酒精消毒30秒,0.1%升汞溶液表面消毒10~12分钟,*后用无菌水漂洗4~5次。放在无菌滤纸上吸干水分,接种于经高压灭菌(121℃、15~20分钟)的初代培养基上。并置于培养室中培养,培养温度23±2℃,光照时间12小时/天,光照强度1500~2000lx。
2、初代培养外植体在初代培养基(MS+3%蔗糖+0.8%琼脂,pH调至5.8)上培养7~10天,腋芽开始萌动、生长,40天后芽长1.5~2cm。此时需及时转接进行继代培养,否则,超过45天后芽逐渐枯死。
3、继代培养将长1.5~2cm的无菌芽从诱导成功的原茎段上切下,接种到继代增殖培养基(MS+6-BA0~0.1mg/L+NAA0~0.02mg/L)上。经过40~50天的培养,从芽的基部可形成3~5个2~3cm高的丛生状不定芽。然后将丛生芽切成1cm的小段(需带1个节),转移至相同成分的新鲜培养基上继代培养,发现在含NAA0.02mg/L的培养基中,随着6-BA浓度的提高(0、0.05、0.1mg/L),芽的发生率显著增加,分别为30%、258%、382%。继代周期40~50天。
4、组培苗的移植和田间管理由于景天在分化与继代培养基中培养8~10天即开始生根,15天生根率可达*,因此可省去生根培养阶段。当培养至40小时左右时,试管苗基部长出3~6条长2~3cm的白根,伴随形成较多的支细根。移植前,将培养40~50天、高4~5cm、具有3~6条根的试管苗置于自然条件下炼苗3天,取出生根小苗,仔细洗去根上附着的培养基,移植至大棚肥沃园土中,移植密度5×5cm。因景天组培苗较为脆嫩,移植时要轻拿轻放,以免损伤茎叶。移植后及时浇透水,注意遮荫,空气湿度保持在80%左右。7天后,移植成活率可达95%以上。景天组培苗移植成活1月左右,长出新的根、茎、叶时,需进行第2次移植,移植密度20×20cm。移植时宜摘掉顶芽,以促分枝发生。在早春、晚秋和冬季需利用塑料大棚等保护设施栽培,以达到野菜四季生产,周年供应的目的。由于景天以取食嫩茎叶为主,生长期中应根据植株长势适时适量追肥,如追施0.1%~0.3%的速效性氮肥(如尿素)或喷施清粪水。此外,及时灌溉,中耕除草,防治病虫等常规管理也不容忽视。当景天植株长至15cm左右时即可进行第1次采摘,以后每隔30天左右可采摘1次。在保护地栽培条件下,年采摘7~8次,667平方米年均产量可达到4000kg左右。