电话：0537-68189081．材料的选择
实践证明，同一个品种个体之间在产量上或病毒感染程度上都有很大的差异。进行茎尖分生组织培养之前，应于生育期，对准备进行脱毒复壮的马铃薯品种或材料，进行田间株选和薯块选择，选择具有该品种典型特性、生长健壮的单株（或无性系），结合产量情况，选择高产、大薯率高、无病斑的单株作为茎尖脱毒的基础材料，以提高脱毒效果。由于马铃薯纺锤块茎类病毒病（PSTV）在目前用植物茎尖分生组织方法很难脱掉，在进行茎尖剥离脱毒前，应先对入选的块茎进行PSTV检测，淘汰带有PSTV的薯块，以免前功尽弃。
2．热处理
为提高脱毒效果，脱毒材料在进行茎尖组织剥取前，应进行材料的热处理，以钝化病毒的活性，消除马铃薯卷叶病毒，提高脱毒效果。把入选的马铃薯块茎进行打破休眠和催芽处理，当薯块顶芽生长至1厘米后，转入光照培养箱内，以每天12小时光照，照度3000LX，37℃的高温处理6-8周。
3．取材和消毒
剪取经过热处理后发芽块茎上2－3厘米长的芽若干个，用软毛刷轻轻逐个刷洗后放于烧杯中，用纱布封口，放于自来水下冲洗半小时，然后在超净工作台进行严格消毒：先用75%的酒精浸15秒，无菌水冲洗2次；再用0.1%的升汞浸泡8-10分钟（或用5%次氯酸钠浸泡15－20分钟），无菌水冲洗5-8次，每次3-5分钟（用无菌水冲洗过程中要不断的晃动放置材料的容器，以保证漂洗更彻底），冲洗完后放在灭过菌的培养瓶内待用。
4．剥离茎尖和接种
在超净工作台上，将消毒过的芽置于40X的解剖镜下，一手用一把眼科镊子将芽按住，一手用灭过菌的解剖针将叶片一层一层仔细剥掉，直至露出圆亮的生长点，用锋利的无菌解剖针小心切取0.3毫米以下的带1-2个叶原基的茎尖，随即将茎尖接种于已准备好的马铃薯茎尖培养基上，以切面接触琼脂。要注意确保所切下的茎尖不能与已剥去部分、解剖镜台或持芽的镊子接触。另外，在剥离过程中，必须注意使茎尖暴露的时间越短越好，因为超净台的气流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干。所以在选择解剖镜的灯源时，尽量以冷光灯为好，同时在材料下垫一张灭过菌的湿滤纸保湿，每剥一个茎尖后，换一张无菌湿滤纸。
由于块茎萌发的芽的数量有限，加上剥离过程中难免损伤到茎尖，导致可剥离的茎尖量少、成苗的机率小，易造成优良品种和材料的丢失。经过多年的实践，我们总结出一种行之有效的方法：取经严格消毒过的块茎芽（1厘米长）接种在不含任何激素的马铃薯快繁培养基上，于25℃的温度，每天光照12小时的培养室培养，3-4周后，待芽长成含4-5片叶子的小苗时，剪切成单节段，转接于同样的无激素MS培养基上，培养成苗。同样方法扩繁1-2个周期，等苗达一定数量后，再直接用这些苗来剥离茎尖，既能保证材料不丢失，又能增加茎尖的数量，从而能增加成苗的机率。
5．茎尖培养与病毒检测
5．1 培养基
选择合适的培养基是茎尖培养成功与否的关键，根据我们的经验，以MS+GA30.2毫克/升+6-BA0.5毫克/升+NAA0.05+肌醇100毫克/升+D－泛酸钙0.2毫克/升+食用白糖3%+琼脂0.6%，PH5.8，为比较好的培养基组合。
5．2 培养
茎尖培养对培养器皿无特殊要求，一般以150毫升三角瓶或250毫升罐头瓶，每瓶装40毫升培养基，为节约培养基，每瓶接种2-3个茎尖，均匀分布于培养基表面。接种好的茎尖放在培养室内培养，温度18-25℃，光照2000-3000LX，每天光照12小时。培养两周后，培养瓶内的茎尖生长点便明显变大变绿，30-40天即可看到明显伸长的小茎，叶原基形成可见的小叶，这时可转入无激素的MS培养基中，小苗继续生长，并形成根系，4-5个月后即可发育成3-4个叶片的小植株，将其按单节切段，进行扩繁，成苗后，用于病毒检测。 5．3病毒检测 由茎尖分生组织培养获得的小苗，经第一次扩繁后要对其进行严格的病毒检测，以确定材料的脱毒情况。一般采用指示植物鉴定法、电镜检测法或抗血清鉴定法，经病毒检测后，确认是不带病毒的株系，才能进一步利用，对继续带病毒的株系应淘汰或进行再次脱毒。
